Juan C. Luis, Francisco Valdés González, Ignacio Frías.
Resumen
Sintesis de Lignanos mediante peroxidasas aisladas de Callos de Bupleurum salicifolium
Se describe el aislamiento de una nueva enzima de peroxidasa que cataliza la transformación del ácido cafeico y el ácido ferúlico mediante acoplamiento oxidativo. La enzima se purificó a partir de cultivos de callos obtenidos de pecíolos de salicifolium Bupleurum. La enzima fué purificada 2900 veces y es una glucoproteína con un PM de 38.000 dalton determinado por SDS PAGE y filtración en gel. Los valores de Km para el cafeico fué de 2,4 x 10-4 M y de 2,6 x 10-4 M para el ácido ferúlico, mientras que los valores de Km para el H2O2 con el ácido cafeico fue de 4 x 10-5 M y para el ácido ferúlico fue de 4,8 x 10 - 4 M. La actividad de la peroxidasa purificada es además activa con los sustratos guayacol y pirogalol aunque a un menor valor y no muestra ninguna actividad con otros fenilpropanoides ensayados (ácidos cinámico, cumárico y 3, 4 dimetoxy cinámico).

Palabras Clave: Bupleurum salicifolium, Apiaceae, cultivo de callos, Peroxidasas, ácido cafeico, ácido ferulico, ácido dehydrocinnamico,

Abstract
Synthesis of Lignans by peroxidase isolated from Callus of the Bupleurum salicifolium
A novel peroxidase that catalyses the transformation of caffeic acid and ferulic acid via oxidative coupling was purified from callus cultures of Bupleurum salicifolium petioles. The enzyme that was purified over 2900 fold is a glycoprotein with a molecular size of 38000, determined by SDS/PAGE and gel filtration. The Km values obtained were for caffeic 2.4 x 10-4 M and for ferulic acid 2.6 x 10-4 M while the Km values for H2O2 with caffeic acid was 4 x 10-5 M and for H2O2 with ferulic acid was 4.8 x 10-4 M. The purified peroxidase exhibits lower activity with typical peroxidase substrates (guaiacol and pyrogallol) than it does with caffeic and ferulic acids, but does not exhibit any activity on other phenylpropanoids tested (cinnamic acid, coumaric acid and 3, 4-dimetoxy cinnamic acid).
Keywords: Bupleurum salicifolium, Apiaceae, callus culture, Peroxidases, caffeic acid, ferulic acid, dehydrocinnamico acid

 

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